???作者:肖時(shí)俊
1、背景
年國(guó)家藥典委員會(huì)(原名衛(wèi)生部藥典委員會(huì)成立于1950年)根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥品管理法》的規(guī)定,負(fù)責(zé)組織編纂《中華人民共和國(guó)藥典》及制定、修訂國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn),是法定的國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn),由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理部門(mén)批準(zhǔn)頒布實(shí)施。新藥典中發(fā)布了對(duì)于藥品澄清度的檢測(cè)要求,它將澄清度由清到濁規(guī)定了0.5-4(見(jiàn)表1)5個(gè)澄清度級(jí)號(hào)。
這個(gè)指標(biāo)實(shí)際上是檢測(cè)了藥品中雜質(zhì)的情況,是衡量藥品質(zhì)量的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn),因此規(guī)定了藥品必須達(dá)到某一個(gè)級(jí)別才能作為合格藥品。這個(gè)指標(biāo)并不僅僅限于溶液藥品,固體藥品同樣也會(huì)有澄清度要求,它通過(guò)將固體藥品溶解于特定溶液后檢查其澄清度,從而確定藥品質(zhì)量。例如常用的鎮(zhèn)靜劑和治療失眠藥片佐匹克隆片,藥典規(guī)定其澄清度不得高于2號(hào)濁度標(biāo)夜。
事實(shí)上,澄清度這個(gè)指標(biāo)是最常見(jiàn)的幾個(gè)藥品不合格項(xiàng)目之一,由于澄清度不合格而導(dǎo)致問(wèn)題也時(shí)常見(jiàn)諸于報(bào)端。因此如果生產(chǎn)的藥品有澄清度要求,藥廠QC部門(mén)一定會(huì)檢測(cè)這個(gè)指標(biāo)。藥典規(guī)定了兩種檢測(cè)方法。一種方法為目視比濁法,即預(yù)先配制好5個(gè)級(jí)號(hào)的濁度標(biāo)液,然后在一定光線下進(jìn)行觀測(cè),但是存在兩個(gè)問(wèn)題,一是不同日期的樣品澄清度沒(méi)有量化的數(shù)據(jù);二是因每個(gè)化驗(yàn)人員的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)不一,當(dāng)需要換班組分析,樣品5個(gè)級(jí)號(hào)的濁度標(biāo)液的濁度值(范圍大概是0-40NTU),然后再檢測(cè)藥品的濁度值,即可得到藥品的澄清度級(jí)號(hào)。這個(gè)方法簡(jiǎn)單而準(zhǔn)確,也消除了人為誤差。HACH公司的2100N和2100AN兩款濁度儀,在這方面可以完全滿足采用儀器法確定藥品澄清度的要求。
但是在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中,哈希公司的工程師發(fā)現(xiàn)由于大多數(shù)藥品價(jià)格昂貴,用戶采集的檢測(cè)樣品量較少,而2100N和2100AN濁度儀一次測(cè)試需要約30mL的樣品量,用戶希望盡可能的減少測(cè)試用的最小樣品量。鑒于此,哈希的工程師利用2100N和2100AN濁度儀,開(kāi)發(fā)了可以應(yīng)用于制藥行業(yè)小微樣品濁度測(cè)試的方法,僅需要2.5mL的樣品量,即可確定藥品的澄清度。該方法也可用于其它有小微樣品濁度測(cè)試需求的行業(yè)。
2、HACH解決方案
哈希公司的應(yīng)用工程師根據(jù)藥典中澄清度標(biāo)液的配置方法(見(jiàn)附錄Ⅸ B),逐級(jí)稀釋配置藥典階梯樣0.5-4號(hào)標(biāo)液,利用哈希2100系列濁度儀,通過(guò)配置梯度濁度標(biāo)液自建工作曲線,得到樣品的濁度測(cè)定值與理論值有良好的線性關(guān)系。
a)利用濁度儀制作的工作曲線來(lái)標(biāo)定藥典澄清度標(biāo)液,標(biāo)定結(jié)果如下:
b)利用該曲線進(jìn)行樣品的測(cè)定,換算為澄清度級(jí)號(hào)來(lái)判斷藥品是否合格。
以某藥企為例,用戶待測(cè)藥品為腫瘤單抗新藥,市場(chǎng)售價(jià)每毫升超萬(wàn)元,檢測(cè)成本高昂。哈希公司提供的解決方案,每次檢測(cè)僅需2.5 ml,大大節(jié)省用戶質(zhì)檢成本。該藥品藥典要求澄清度級(jí)號(hào)為3號(hào)(18.4 NTU),實(shí)測(cè)結(jié)果濁度值為15.4 NTU,低于藥典要求,證明該藥品合格。
溶液澄清度
中國(guó)藥典:
附錄Ⅸ B澄清度檢查法
本法系在室溫條件下,將用水稀釋至一定濃度的供試品溶液與等量的濁度標(biāo)準(zhǔn)液分別置于配對(duì)的比濁用玻璃管(內(nèi)徑 15 – 16 mm,平底,具塞,以無(wú)色、透明、中性硬質(zhì)玻璃制成)中,在濁度標(biāo)準(zhǔn)液制備5分鐘左右后,在暗室內(nèi)垂直同置于傘棚燈下,照度為1000 lx,從水平方向觀察、比較;用以檢查溶液的澄清度或其渾濁程度。除另有規(guī)定外,供試品溶解后應(yīng)立即檢視。 品種項(xiàng)下規(guī)定的“澄清”,系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑,或未超過(guò) 0.5 號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液。“幾乎澄清”則指供試品溶液的濁度介于0.5號(hào)至1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度之間。
濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備 稱(chēng)取于105 ℃干燥至恒重的硫酸肼1.00 g,置100 mL量瓶中,加水適量使溶解,必要時(shí)可在 40 ℃的水浴中溫?zé)崛芙?,并用水稀釋至刻度,搖勻,放置 4 – 6 小時(shí);取此溶液與等容量的 10%烏洛托品溶液混合,搖勻,于 25 ℃避光靜置24小時(shí),即得。本液置冷處避光保存,可在兩個(gè)月內(nèi)使用,用前搖勻。
濁度標(biāo)準(zhǔn)原液的制備 取濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液 15.0 mL,置 1000 mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,取適量,置1 cm吸收池中,照紫外-可見(jiàn)分光光度法(附錄Ⅳ A),在550 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定,其吸光度應(yīng)在0.12 – 0.15范圍內(nèi)。本液應(yīng)在48小時(shí)內(nèi)使用,用前搖勻。
濁度標(biāo)準(zhǔn)液的制備 取濁度標(biāo)準(zhǔn)原液與水,按下表配制,即得。本液應(yīng)臨用時(shí)制備,使用前充分搖勻。